作為生命科學實驗室的“細胞觀察利器”，尼康TS2倒置顯微鏡憑借其CFI60無限遠光學系統(tǒng)、LED照明模塊及人體工學設(shè)計，成為細胞培養(yǎng)、熒光成像等領(lǐng)域的首選設(shè)備。本文將從基礎(chǔ)操作到高階功能，系統(tǒng)解析TS2顯微鏡的使用方法。
一、設(shè)備結(jié)構(gòu)與核心組件
TS2顯微鏡采用模塊化設(shè)計，主要包含以下核心組件：
1.光學系統(tǒng)：CFI60無限遠校正光學系統(tǒng)，支持明場、相差、浮雕反差及落射熒光觀察。
2.照明模塊：高亮度白光LED透射照明（Ts2型號）或LED透射+落射熒光照明（Ts2-FL型號），波長覆蓋385-625nm。
3.載物臺：平板載物臺（170×247mm）或可選機械載物臺（126×78mm行程），兼容35mm/100mm培養(yǎng)皿、微孔板及載玻片。
4.控制面板：前面板集成電源開關(guān)、透射/熒光切換按鈕；左側(cè)控制透射光亮度，右側(cè)控制熒光強度。
5.物鏡轉(zhuǎn)盤：五孔物鏡轉(zhuǎn)盤，支持10×、20×、40×等倍率物鏡快速切換。
二、基礎(chǔ)操作流程
1. 開機準備
設(shè)備放置：將顯微鏡置于生物安全柜或?qū)嶒炁_邊緣，確保載物臺處于低位（避免物鏡碰撞）。
電源連接：接入100-240V交流電，打開前面板電源開關(guān)，LED指示燈亮起。
物鏡選擇：旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤至4×物鏡（低倍物鏡），避免高倍物鏡直接接觸載玻片。
2. 光源調(diào)節(jié)
透射光：通過左側(cè)旋鈕調(diào)節(jié)亮度，配合聚光鏡光柵控制光照范圍。
熒光光（Ts2-FL型號）：選擇熒光波長（如488nm激發(fā)GFP），通過右側(cè)旋鈕調(diào)節(jié)強度，使用遮光板減少環(huán)境光干擾。
3. 載玻片放置
培養(yǎng)皿：使用專用托板（如CS-HP35）固定35mm培養(yǎng)皿，確保細胞層朝上。
微孔板：將96孔板置于機械載物臺，通過X/Y軸旋鈕定位目標孔。
載玻片：用壓片夾固定玻片，調(diào)整載物臺使標本對準通光孔中心。
4. 調(diào)焦與觀察
低倍鏡（4×/10×）：
側(cè)面注視物鏡，緩慢旋轉(zhuǎn)粗調(diào)旋鈕使載物臺上升，直至物鏡接近標本（間距約2mm）。
左眼觀察目鏡，反向旋轉(zhuǎn)粗調(diào)旋鈕下降載物臺，直至出現(xiàn)模糊影像，再微調(diào)細調(diào)旋鈕至清晰。
高倍鏡（20×/40×）：
在低倍鏡下將目標移至視野中央，切換至高倍物鏡。
僅使用細調(diào)旋鈕微調(diào)焦距，避免壓碎標本。
5. 相差與浮雕反差觀察
相差觀察：安裝相差物鏡（如10×PH）及預對中相差滑塊，調(diào)整聚光鏡高度至75mm（ELWD聚光鏡），獲得高對比度細胞輪廓。
浮雕反差觀察：安裝浮雕反差滑塊（聚光鏡側(cè)+目鏡筒側(cè)），通過調(diào)焦照明實現(xiàn)偽三維成像，適用于厚標本（如iPS細胞球）。
三、高階功能應用
1. 熒光成像
濾光塊選擇：根據(jù)熒光標記選擇濾光塊（如FITC濾光塊用于GFP觀測）。
曝光控制：通過右側(cè)旋鈕調(diào)節(jié)LED強度，避免光漂白；使用相機端口連接CCD相機，設(shè)置適宜曝光時間。
多色熒光：Ts2-FL型號支持同時安裝3種熒光LED單元，通過濾光塊轉(zhuǎn)盤切換波長，實現(xiàn)多標記共定位分析。
2. 長時程活細胞監(jiān)測
環(huán)境控制：將顯微鏡置于培養(yǎng)箱內(nèi)，維持37℃、5% CO?條件。
自動聚焦：搭配尼康NIS-Elements軟件，啟用硬件自動聚焦功能，實現(xiàn)72小時連續(xù)成像。
數(shù)據(jù)管理：通過相機端口實時傳輸圖像至計算機，使用軟件進行時間序列分析。
四、關(guān)機與維護
1.關(guān)機步驟：
降低載物臺至最低位，切換至4×物鏡。
關(guān)閉光源（推拉亮度調(diào)節(jié)器至暗檔），關(guān)閉電源開關(guān)。
取下標本，用擦鏡紙清潔物鏡及目鏡。
2.日常維護：
定期檢查LED壽命（通常＞20,000小時），更換老化光源。
使用專用清潔液擦拭機身，避免酒精腐蝕涂層。
存放時覆蓋防塵罩，避免物鏡受潮。
五、常見問題解決
圖像模糊：檢查物鏡是否鎖緊，重新調(diào)焦或清潔鏡頭。
熒光信號弱：確認濾光塊匹配熒光波長，增加LED強度或延長曝光時間。
載物臺抖動：檢查機械載物臺鎖緊螺絲是否擰緊，避免外力碰撞。
尼康TS2倒置顯微鏡通過智能化設(shè)計與模塊化擴展，為細胞研究提供了高效、精準的解決方案。掌握其操作技巧，可顯著提升實驗效率與數(shù)據(jù)質(zhì)量，助力生命科學前沿探索。
